本期讲座，胡端敏教授围绕如何提高EUS-FNA阳性率，介绍处理EUS-FNA标本的策略和技巧，即

- 充分利用标本：合理步骤、多种方法

- 准确评估标本：ROSE和MOSE

一、充分利用标本，减少丢失

① EUS-FNA的标本构成包括：

② 处理EUS-FNA的策略包括四种方法：

③ 液基细胞学（单细胞标本）是将脱落细胞保存在液体中，并通过特殊设备将细胞均匀分散贴附在载玻片上制成涂片的技术。这种技术可减少阻碍视线的血液、粘液和炎细胞的数量。以下是液基细胞学和常规涂片对比观察到的肿瘤细胞（胰腺癌EUS-FNA标本）。

④ 细胞块（碎屑标本）是组织学制片方法在细胞学标本中的应用，是将分散的细小组织、细胞团、细胞聚集成团，制得细胞块之后进行石蜡包埋切片。该技术可以保留更多的组织学结构，细胞块切片有助于免疫组化、基因检测等辅助检查在细胞学中的应用。下图是细胞块技术图片。

⑤ EUS-FNA标本多种处理流程

每次先用针芯将标本推送到液基中，漂洗标本后，将组织条挑出送细胞块或组织病理，剩下的送检液基细胞学。(如下示意图)

最后针内少量液体用注射器吹到载玻片上，进行涂片

⑥ 采取多种方法，全面收集和利用EUS-FNA标本内多种成分，有助于提高诊断率。以下是典型病例，具体内容参考文献^[1]

二、精确评估标本，增强信心

根据《中国内镜超声引导下细针穿刺临床应用指南》^[2]，对于初级细针穿刺实施者或总体检出率低于90%的内镜中心，应当配备ROSE以提高细针穿刺检出率。对于没有条件设立ROSE的内镜中心，也可以考虑对内镜医师进行初步的细胞学培训后进行现场病理评估。

• ROSE涂片的制作和评估

① 器械准备：95%酒精、吉姆萨染色液、标本固定盒、吹风机、载玻片、申请单

② 制作方法：

平推法（用于非黏液性标本）：A. 将1滴标本加在载玻片一端，B. 取1张推片向后接触标本，C. 将推片向前移动或者两张载玻片面对面对拉制成涂片，D. 细胞分布在图片周边和末端

对拉法：制片时将标本滴在一张载玻片上，另一种载玻片“面对面”，用适当的力将两张片子平行反向拉开是标本呈颗粒状或者不透明状分布在载玻片上。

③ 肉眼观察涂片质量，载玻片上白色不定型物为组织细胞，颗粒样物有时为细条状，涂抹均匀后为细颗粒状。

④ 快速染色步骤（吉姆萨染色）：

- 将细胞涂片风干或者吹干。

- 将A液滴在载玻片上，染色约1-2分钟。

- 将B液滴少许在含A液的载玻片上，晃动混匀约15秒。

- 用清水轻轻冲洗染料，镜下观察。

⑤ 评价涂片质量，消化科医生一般考虑以下三点：

- 涂片是否均匀，便于形态观察?细胞是否丰富?

- 有无因外力影响细胞形态，影响诊断?

- 细胞是病变细胞还是正常上皮?

对于涂片质量以及正常成分（血细胞、粘液、正常胃肠道上皮等）和异常成分（肿瘤细胞、炎症细胞等）的判别详见视频讲解。

• 标本的肉眼评估（MOSE）

MOSE的英文全称是 Macroscopic On-Site Quality Evaluation，中文为大体标本的现场评估指不依赖于病理科医师，由内镜医师对EUS-FNA组织条进行现场观察，判断是否含有有用的组织核心(core tissue)。

① 改良MOSE（设备）：

② 操作步骤：

每次所得的标本预先用液基细胞保存液漂洗，分散血块后，在放大镜协助下将白色/肉色组织条用镊子移至装有福尔马林的带刻度培养皿上充分展开进行精确测量。随后，将含有血块的液基细胞液送检液基细胞学，组织条送检细胞块。

③ 经过研究发现，肉眼大体观察的core tissue的长短能有效预估组织学质量，以下是经典病例：

胰腺神经内分泌肿瘤

胰腺实性假乳头状瘤

前列腺癌直肠周围转移

[1] Huang J, Liang Y, Xu L, Hu D. Diagnostic efficacy of different pathologic methods for assessing tissue obtained by endoscopic ultrasound-guided fine needle aspiration: a prospective study. Int J Clin Exp Pathol. 2021 Jan 1;14(1):34-44. PMID: 33532021; PMCID: PMC7847493.

[2] 中华医学会消化内镜学分会超声内镜学组. 中国内镜超声引导下细针穿刺临床应用指南 [J] . 中华消化内镜杂志, 2017, 34(1) : 3-13. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1007-5232.2017.01.002.